CHO細(xì)胞全解析｜生物制藥的核心載體

一、CHO細(xì)胞概要

?CHO細(xì)胞（Chinese hamster ovary cell）?是一種從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中分離出來(lái)的細(xì)胞系，具有無(wú)限分裂的能力，常用于生物制藥中的重組蛋白生產(chǎn)。CHO細(xì)胞具有多種優(yōu)點(diǎn)，如快速生長(zhǎng)、易于培養(yǎng)、高產(chǎn)量等，因此被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是在蛋白質(zhì)表達(dá)和純化方面表現(xiàn)出色?

全稱：Chinese Hamster Ovary（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞）

建系時(shí)間：1957年由Theodore Puck團(tuán)隊(duì)建立

二、CHO細(xì)胞關(guān)鍵特性

蛋白翻譯后修飾能力（糖基化模式近人源）

懸浮培養(yǎng)適應(yīng)性（可達(dá)20×10? cells/mL密度）

基因組穩(wěn)定性（平均染色體數(shù)21條）

三、CHO細(xì)胞技術(shù)演進(jìn)史

注：當(dāng)前量產(chǎn)抗體表達(dá)量＞5g/L

四、CHO細(xì)胞核心應(yīng)用領(lǐng)域

五、CHO 細(xì)胞產(chǎn)業(yè)化優(yōu)勢(shì)與局限

? 核心優(yōu)勢(shì)

人源化N-糖基化（降低免疫原性）

耐受長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)灌流培養(yǎng)（90天+）

可構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)克?。ǎ?/span>100代穩(wěn)定性）

?? 技術(shù)瓶頸

培養(yǎng)成本昂貴（無(wú)血清培養(yǎng)基$200/L）

潛在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)（需三重除病毒過(guò)濾）

蛋白過(guò)度甘露糖化問(wèn)題（影響半衰期）

六、CHO細(xì)胞關(guān)鍵操作規(guī)范

1. 培養(yǎng)條件

溫度：37℃（對(duì)數(shù)期）→32℃（生產(chǎn)期）

pH控制：6.8-7.2（碳酸鹽緩沖系統(tǒng)）

2. 轉(zhuǎn)染試劑選擇

聚乙烯亞胺（PEI）轉(zhuǎn)染效率＞75%

電穿孔法適用于難轉(zhuǎn)染克隆

3. 篩選系統(tǒng)

DHFR/MTX系統(tǒng)（甲氨蝶呤加壓篩選）

GS/MSX系統(tǒng)（蛋氨酸硫代類似物）

七、購(gòu)買渠道

【ATCC代理——天津益元利康生物科技有限公司】